發(fā)布時間:2014-02-12 16:41:47
影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時間外還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數(shù)量、微生物細胞含水量、微生物細胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等,分述如下。
培養(yǎng)基成分
培養(yǎng)基中脂肪、糖分和蛋白質(zhì)的含量越高,微生物的熱死亡速率就越慢。這是因為在熱死溫度下,脂肪、糖分和蛋向質(zhì)等有機物質(zhì)在微生物細胞外面形成一層薄膜,該薄膜能有效保護微生物細胞抵抗不良環(huán)境,所以滅菌溫度相應要高些。相反,高濃度的鹽類、色素等的存在會削弱微生物細胞的耐熱性,故一般較易滅菌。
培養(yǎng)基的物理狀態(tài)
固體培養(yǎng)基比液體培養(yǎng)基滅菌時間長,原因在于液體培養(yǎng)基滅菌時,熱的傳遞除了傳導外,還有對流作用,固體培養(yǎng)基則只有傳導作用而沒有對流作用,況且液體培養(yǎng)基中水的傳熱系數(shù)要比有機固體物質(zhì)大得多。在實際工作中,對于含有小于1mm的顆粒培養(yǎng)基,可不必考慮顆粒對滅菌的影響,但對于含有少量大顆粒及粗纖維的培養(yǎng)基的滅菌,則要適當提高溫度,且在不影響培養(yǎng)基質(zhì)量的條件下,采用粗過濾的方法預先處理,以防止培養(yǎng)基結(jié)塊而造成滅菌的不。
培養(yǎng)基的PH
培養(yǎng)基的PH愈低,滅菌所需的時間就愈短。PH 6—8時,微生物最耐熱;pH小于6,氫離子易滲入微生物細胞內(nèi),從而改變細胞的生理反應促使其死亡。
培養(yǎng)基中的微生物數(shù)量
培養(yǎng)基中微生物數(shù)量越多,達到要求滅菌效果所需的滅菌時間也越長,培養(yǎng)基中不同數(shù)量的微生物孢子在105℃下滅菌所需的時間不同。在生產(chǎn)實際中,不宜采用嚴重霉變的原料和腐敗的水質(zhì),因為這類原料中不但有效成分少,而且微生物數(shù)器多,滅菌比較困難。培養(yǎng)基中微生物孢子數(shù)目對滅菌時間的影響。
微生物細胞中水含量
在一定范圍內(nèi),微生物細胞含水越多,則蛋白質(zhì)的凝固溫度越低,也就越容易受熱凝固而喪失生命活力。
微生物細胞的菌齡
微生物菌齡不同對高溫的抵抗能力也不同,年老細胞對不良環(huán)境的抵抗力要比年輕細胞強,這與細胞中蛋向質(zhì)的含水量有關(guān),年老細胞中水分含量低,年輕細胞含水量高,因此年輕細胞容易被殺死。
微生物的耐熱性
各種微生物對熱的抵抗力是不同的,細菌的營養(yǎng)體、酵母、霉菌的蔭絲體對熱較為敏感,而放線菌、霉菌孢子比營養(yǎng)細胞的抗熱性要強,細菌芽孢的抗熱性就更強。一般講,無芽抱的細菌或霉菌孢子在100℃加熱3—5 min都可被殺死,但是有些細菌芽孢的熱阻較人,100℃30 min仍未被殺死,所以滅菌的與否應以殺死細菌芽孢為標準。
空氣排除情況
蒸汽滅菌過程中,溫度的控制是通過控制罐內(nèi)的蒸汽壓力來實現(xiàn)。壓力表所顯示的應與罐內(nèi)蒸汽壓力相對應,即壓力表的壓力所對應的溫度應是罐內(nèi)的實際溫度 但是如果罐內(nèi)空氣排除不完全,壓力表所顯示的壓力就不單是罐內(nèi)蒸汽壓力,還包括空氣分壓,因此,此時罐內(nèi)的實際溫度就低于壓力表顯示壓力所對應的溫度,以致造成滅菌溫度不夠而滅菌不。
攪拌
在整個滅菌過程中,必須保持培養(yǎng)基在罐內(nèi)始終均勻地充分翻動,使培養(yǎng)基不致因翻動不均勻造成局部過熱,從而過多破壞營養(yǎng)物質(zhì)或造成局部(亦稱死角)溫度過低麗殺菌不透等,要保持培養(yǎng)基翻動良好,除了攪拌外,還必須正確控制進、排汽閥門,在保持一定溫度和罐壓的情況下,使培養(yǎng)基得到充分的翻動,是滅菌的要點之一。
泡沫
在培養(yǎng)基滅菌過程中,培養(yǎng)基產(chǎn)生的泡沫對滅菌極為不利,要注意防止培養(yǎng)基出現(xiàn)泡沫,因為泡沫中的空氣形成隔層,使熱量難以傳遞.使熱量難以滲透進去,不易達到微生物的致死溫度,從而導致滅菌不。泡沫的形成主要是由于進汽排汽不均衡而致。如果在滅菌過程中突然減少進汽或加大排汽,則立即會出現(xiàn)大量泡沫,對極易發(fā)泡的培養(yǎng)基應加消泡劑以減少泡沫量。
本文參考《發(fā)酵工程原理與技術(shù)》一書。
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